慢病毒包装
慢病毒属于逆转录病毒科,目前实验研究用的慢病毒载体是以 HIV-1 为基础经改造除致病基因,同时减少辅助质粒与载体质粒的同 源性,使 慢病毒具有了滴度更高、生物安全性更好、导入外源片段的能力更强等特性。利用慢病毒能够有效感染分裂和有非分裂细胞的特性,可将外源基因有效地整合到宿主 细胞核染色体上,从而达到持久性表达。已经广泛应用到基因过表达、基因干扰及基因敲除等功能研究实验,也可通过病毒载体上携带各种药物筛选基因获得稳定表 达的各种细胞模型。
赛伯(CyPeogen ) 生物技术平台利用慢病毒表达系统推出慢病毒基因过表达、shRNA慢病毒、cas9慢病毒等各项定制服务。
慢病毒包装定制服务及相关项目:
慢病毒平台特点:
可以直接侵染非分裂细胞或分裂细胞,原代细胞、干细胞、肿瘤细胞等,借助自身所带有的各种药物
抗性基因和GFP/RFP荧光蛋白,便于后续细胞建系筛选和体内示踪
病毒颗粒是复制缺陷型,在转导并整合到细胞后不再具有产生具有包装能力的病毒基因组,确保其研究使用的安全性。
组织特异性或细胞特异性启动子和广泛表达启动子。
服务流程:
1. 慢病毒载体的构建和质粒纯化。
2. 各功能质粒共转染293T细胞进行慢病毒包装。
3. 培养48~72h,收集培养上清。(也可取上清感染靶细胞)
4. 病毒的纯化和浓缩(超离心/或超滤)。
5. 病毒滴度检测
客户提供:
定制过表达慢病毒,需提供含有目的基因的质粒(含测序结果)或目的基因名称、GeneBank ID 序列由我们合成或调取(基因获取费用另计)。
提供所需要的病毒滴度及总量。
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